2014年6月20日,植物生物学权威期刊《The Plant Cell》上在线发表了太阳集团城网站2003杨洪全课题组在植物光信号转导分子机制研究方面的新进展“COP1 and phyB Physically Interact with PIL1 to Regulate Its Stability and Photomorphogenic Development in Arabidopsis (http://www.plantcell.org/content/early/2014/06/20/tpc.113.121657.long)。该研究阐释了模式植物拟南芥PIL1蛋白通过与光形态建成的关键负调控因子COP1以及红光受体phyB相互作用来调控光形态建成的分子机理。太阳集团城网站2003博士生骆倩为该论文的第一作者。
光是最重要的环境因子,不仅是植物光合作用的能量来源,同时也是调控植物生长发育的信号来源。植物通过内在感应光的信号分子——光受体介导的信号转导途径来调控植物的生长发育。在模式植物拟南芥中,隐花素 (CRY) 和光敏素 (PHY) 是两种极为重要的光受体。它们分别感受及转导蓝光和红光/远红光信号。在拟南芥光受体的下游存在一个含有锌指结构域的E3泛素连接酶——COP1。光受体和COP1直接相互作用,导致COP1活性受抑制,并使其下游的转录因子例如:HY5、HFR1发生积累,从而促进光形态建成。 在红光/远红光受体光敏素 (PHY)下游还存在一类转录因子PIFs,发挥负调控光形态建成的作用。
在红光下,红光受体phyB进入细胞核中,一方面抑制COP1活性并促进其出核,另一方面促进PIFs蛋白降解,从而促进光形态建成。但是目前还不清楚是否存在更多的因子参与phyB-COP1信号转导通路,以及它们共同调控光形态建成的分子机制。首先,该研究通过一系列生化试验分析,发现PIL1是COP1下游新的相互作用因子,并阐释了PIL1调控光形态建成的分子机理。通过酵母双杂交、体内蛋白质共定位及免疫共沉淀(Co-IP)等分析, 揭示了COP1和PIL1存在直接的蛋白相互作用,该互作促进PIL1在黑暗下发生依赖于26S蛋白酶体的降解。通过构建cop1 pil1,cop1 hfr1,cop1 pil1 hfr1和pil1 hfr1等突变体,并进行遗传关系分析,结果发现PIL1和HFR1在遗传上都上位于COP1调控光形态建成。PIL1和HFR1直接相互作用,协同促进光形态建成。其次,该研究通过酵母双杂交、蛋白质体内共定位、双分子荧光互补 (BiFC) 和 Co-IP 分析,揭示了拟南芥phyB和PIL1存在直接的依赖于红光的蛋白相互作用,并且该相互作用会促进PIL1和COP1在红光下的解离,从而增强PIL1蛋白在红光下的稳定性。遗传关系分析表明,PIFs位于PIL1的下游调控光形态建成。生化和基因表达分析表明,PIL1与PIFs (PIF1,PIF3, PIF4和PIF5) 发生直接的蛋白相互作用,并同HFR1一道共同在红光照射的初期快速抑制PIFs的转录活性。上述研究揭示了PIL1和HFR1作为光形态建成的正调控因子与PIFs相互拮抗,在phyB和COP1下游共同参与光形态建成的精细调控。
该研究得到了国家自然科学基金委、国家教育部创新研究团队项目的支持。
太阳集团城网站2003 骆倩